玉米由所以单性花、异花授粉,因而在杂交时,不需要去雄,因而也不需要整穗。其杂交办法和过程主要为调理开花期、选株、阻隔、采粉、授粉和收成等。 调理开花期 玉米因为单性花,在调理开花期方面,有必要使母本的雌穗和父本的雄穗的花期共同。可用分期耕种的办法调理父、母本的花期。 选株 父、母本均应挑选成长强健、无病虫灾和具有本种类典型性状的植株,作为杂交目标。 套袋阻隔 当母本植株的雌穗现已显露而没有伸出柱头曾经,用牛皮纸袋套好雌穗。当母本雌穗开端抽出柱头时,要在当天用牛皮纸袋套在父本植株的雄穗上,雌、雄穗的纸袋,要用细绳或回形针扎紧,避免掉落。 采粉 从上述玉米的开花习性中不难得知,其雄穗在始花后的第2~4天内开花最多,进入盛花期,一天中开花最多的时刻是上午8~10时,而此刻花粉的生活力也最强;雌穗在始花后的第2~4天,处于盛花期,柱头已根本抽齐。因而,采粉时刻应挑选父、母本的盛花期、并挑选上午8~10时进行采粉。收集花粉时,将父本雄穗稍稍下弯,悄悄颤动,用人工辅佐授粉器盛接花粉、采粉时要避免其它种类的花粉混入。 人工辅佐授粉器是用润滑的厚纸制成1个圆锥形的纸筒,用厚纸作纸盖盖住下口,另外用细铁丝网做成1个筛子,平放于低筒内。收集的花粉可通过筛子均匀授到柱头上。 授粉 授粉时,先取下雌穗上的纸袋,当即用人工辅佐授粉器的下口对准雌穗的柱头,悄悄颤动授粉器,使花粉落在柱头上。 授粉后,仍用本来的纸袋将雌穗套好,但应在袋顶和穗顶之间留出必定的间隔,以避免因果穗伸长而顶破纸袋。纸袋套好后,应在雌穗基部拴上纸牌(或塑料牌),写明杂交组合、授粉日期和操作者名字等项内容。 收成 母本果穗成熟后,应连同纸牌(或塑料牌)一同独自收成,并独自保存,供来年耕种查验杂交是否成功。
最近在做transwell预试验,用的Millipore transwell小室,8um孔径,说明书说不必铺胶,每孔10万个细胞,试了不同的培育时刻,用结晶紫或DAPI染色后,发现膜上都没有细胞,只要相似下图中的圆圈,看着也不是细胞,加了因子的试验组圆圈数量要比对照组多。初度做这个试验,不知道是什么原因,恳请高手帮我剖析一下。
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细胞生物学试验手册3.成像技能、电子显微技能、扫描探针和扫描电子显微技能、显微解剖、安排矩阵、细胞遗传学和原位杂交、基因组学、转基因、基因敲除和基因消减等办法
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